紫外分光光度計測定樣品步驟
更新時間:2018-07-31點(diǎn)擊次數(shù):12600
1、首先,知道所需要測量物質(zhì)的特征吸收波長是多少,這個可在國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或方法。例如測量總氮的話,就需要220和275nm這2個波長,所以必須買紫外的光度計,并且盡量帶雙波長測定功能,例如測總磷是697nm,只需買臺可見光度計就可以了。
2、第二步:知道所測量的物質(zhì)的實(shí)驗方法,需要哪些儀器和設(shè)備,還有玻璃器皿等,同時還有比較完成測量所需要的所有化學(xué)試劑等。這個可以在標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒灧椒ㄖ姓业剑驹诨ヂ?lián)網(wǎng)上都可以找到電子版的測量方法。
3、第三步:配置好所需測量物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液,一般是5~8個標(biāo)準(zhǔn)溶液,濃度建議從高到低,建議每個不同濃度貼上標(biāo)簽,以防順序搞錯。注意,部分實(shí)驗需要往標(biāo)準(zhǔn)溶液中加顯色劑之后才可以用光度計進(jìn)行測量。
4、第四步:設(shè)置好光度計的測量波長,這就需要熟悉光度計的基本操作,一般測量物質(zhì)的濃度都是用的標(biāo)準(zhǔn)曲線法,就是對應(yīng)光度計中的定量測量功能。具體操作時步,把儀器的波長調(diào)整到我們所需要的波長,例如測量總磷直接把波長走到697nm,之后放入裝好蒸餾水的比色皿到樣品室做空白,就是熟稱的調(diào)零。第三部把標(biāo)準(zhǔn)溶液放入樣品室,依次測量他們的吸光度,儀器一般會自動記錄之后就會給出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,實(shí)驗完畢。如果儀器不能直接記錄吸光度,可以先記在筆記本上,之后用excel軟件進(jìn)行計算標(biāo)準(zhǔn)曲線。判斷做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線是否能用,看哪個R值即那個相關(guān)系數(shù),一般少做出0.999就可以用了,差一點(diǎn)的儀器也可以做出0.99.
5、第五步:把未知樣品放入樣品室就可以直接測量出樣品濃度。